Calculadora de concentración tras una dilución de qPCR

Calcula la concentración final de una muestra destinada a qPCR después de añadir un volumen conocido de diluyente. Es útil al preparar estándares, controles o muestras cuando se parte de una solución madre y se necesita comprobar qué concentración tendrá la mezcla antes de continuar con el ensayo.

Además de la concentración final, la página muestra el factor de dilución, el volumen total y la cantidad de material aportada por la alícuota inicial. Estos valores permiten revisar rápidamente si la preparación mantiene la relación prevista entre muestra y diluyente. La calculadora presupone una mezcla homogénea y que la cantidad de analito se conserva durante la dilución; no corrige pérdidas por adsorción, pipeteo o degradación.

Datos de la dilución

ng/µL
µL
µL
Resultado
concentración final
Factor de dilución
Volumen total
Cantidad de analito

1. Indica la concentración de partida
Introduce la concentración de la solución madre con la misma unidad que quieres obtener al final.

2. Añade el volumen de muestra
Especifica cuánto volumen de la solución madre vas a transferir.

3. Añade el diluyente
Introduce el volumen de agua, tampón u otro diluyente que se incorporará.

4. Revisa la concentración final
Comprueba la concentración resultante junto con el factor de dilución y el volumen total.

5. Mantén unidades coherentes
Si usas otra unidad de concentración, conserva esa misma unidad en todo el cálculo; la relación numérica no cambia.

Cfinal = Cinicial × Vmuestra / (Vmuestra + Vdiluyente)

Donde Cinicial es la concentración de la solución de partida; Vmuestra es el volumen transferido; y Vdiluyente es el volumen añadido. El factor de dilución se obtiene como (Vmuestra + Vdiluyente) / Vmuestra.

El modelo aplica conservación de la cantidad de analito y supone que los volúmenes son aditivos.

Qué significa el resultado

El valor principal indica la concentración esperada después de mezclar la alícuota de muestra con el diluyente indicado.

En trabajos de qPCR conviene considerar por separado la incertidumbre de pipeteo y cualquier pérdida o degradación de la muestra.

Datos: solución de 100 ng/µL, 10 µL de muestra y 90 µL de diluyente.

Cálculo: volumen total = 10 + 90 = 100 µL. Concentración final = 100 × 10 / 100 = 10 ng/µL. Factor de dilución = 100 / 10 = 10×.

Resultado: la mezcla queda a 10 ng/µL y contiene 1.000 ng de material en 100 µL.

¿Una dilución 1:10 equivale a un factor 10?

Sí, cuando una parte de muestra queda contenida en diez partes de volumen total. La concentración final es entonces una décima parte de la inicial.

¿Puedo usar copias/µL en vez de ng/µL?

Sí. La ecuación de dilución funciona con cualquier unidad de concentración coherente, siempre que uses la misma unidad antes y después.

¿El volumen final siempre es la suma de los dos volúmenes?

La calculadora lo supone. En mezclas de laboratorio habituales es una aproximación práctica, aunque ciertas combinaciones pueden presentar pequeñas desviaciones de volumen.

¿Qué ocurre si no añado diluyente?

El factor de dilución es 1× y la concentración final coincide con la concentración inicial.

¿Esta concentración sustituye una cuantificación experimental?

No. Es un valor teórico basado en los volúmenes introducidos; una medición experimental puede diferir por errores de pipeteo, degradación u otras pérdidas.