qPCR Dilution Reagent Volume Calculator

Esta calculadora determina cuánto volumen de una solución de partida y cuánto diluyente se necesitan para preparar una dilución destinada a qPCR. Utiliza la ecuación C₁V₁ = C₂V₂ y está orientada a preparaciones de estándares, controles o muestras cuando se conoce la concentración inicial y la deseada.

El resultado es especialmente útil para planificar volúmenes antes de montar una serie de diluciones. En diluciones seriadas, cada paso debe calcularse respecto a la concentración real de la solución que actúa como punto de partida en ese paso; no conviene aplicar el factor acumulado como si fuese una única transferencia cuando los volúmenes se vuelven impracticables.

Datos de entrada

copias/µL
copias/µL
µL
Resultado
µL de diluyente
Volumen de partida
Volumen de diluyente
Factor de dilución

1. Introduce la concentración de partida
Usa la concentración del estándar, control o muestra que vas a diluir.

2. Define el objetivo
Introduce la concentración deseada en la misma unidad.

3. Indica el volumen final
Especifica cuánto volumen total quieres preparar para ese punto de dilución.

4. Revisa los dos volúmenes
La calculadora separa el volumen que debes tomar de la solución de partida y el volumen de diluyente que completa la preparación.

5. Planifica series con pasos manejables
Si el volumen de partida calculado es demasiado pequeño, usa diluciones seriadas intermedias compatibles con tu protocolo.

V₁ = (C₂ × V₂) ÷ C₁
Diluyente = V₂ − V₁
Factor de dilución = C₁ ÷ C₂

Las concentraciones deben estar en la misma unidad. El modelo se aplica a una dilución simple ideal.

Qué significa el resultado

El resultado principal es el volumen de diluyente que debe añadirse al volumen calculado de solución de partida para alcanzar el volumen y la concentración objetivo.

El resultado es una ayuda de planificación de laboratorio. Verifica siempre el protocolo, las concentraciones y los volúmenes mínimos recomendados para tus reactivos y equipos.

Datos: 100.000 copias/µL de partida, 10.000 copias/µL de objetivo y 120 µL finales.

Cálculo: V₁ = (10.000 × 120) ÷ 100.000 = 12 µL. Diluyente = 120 − 12 = 108 µL. Factor = 100.000 ÷ 10.000 = 10.

Resultado: mezclar 12 µL de solución de partida con 108 µL de diluyente para una dilución 1:10.

¿Puedo usar copias/µL, ng/µL u otra unidad?

Sí, siempre que la concentración inicial y la objetivo utilicen exactamente la misma unidad.

¿Cómo se aplica a una serie 1:10?

Cada paso puede prepararse con una parte de la solución anterior y nueve partes de diluyente para obtener diez partes totales, siempre que los volúmenes sean adecuados al protocolo.

¿Qué hago si el volumen calculado de partida es inferior a lo que puedo pipetear con precisión?

Aumenta el volumen final o introduce una dilución intermedia. Evita depender de transferencias por debajo del rango fiable de tu equipo.

¿La calculadora considera pérdidas por adsorción o pipeteo?

No. El cálculo es estequiométrico y supone transferencia ideal; los procedimientos de qPCR pueden requerir materiales y prácticas específicas para minimizar pérdidas.

¿Cuál es la diferencia con un calculador de factor de dilución?

Aquí el resultado principal son los volúmenes concretos para preparar una dilución. Un estimador de factor se centra en la relación entre concentraciones, aunque ambas magnitudes están conectadas.