- Introduce la absorbancia A260. Usa la lectura corregida con el blanco correspondiente.
- Indica el factor de dilución. Si mediste la muestra sin diluir, utiliza 1.
- Revisa la concentración. El resultado principal se expresa en ng/µL.
- Comprueba el contexto de la medida. Valora por separado la pureza y el intervalo lineal del espectrofotómetro.
Calculadora de concentración de ARN
Esta calculadora estima la concentración de ARN a partir de una lectura de absorbancia a 260 nm y del factor de dilución aplicado a la muestra. Utiliza la relación espectrofotométrica habitual para ARN monocatenario, donde A260 = 1 equivale aproximadamente a 40 µg/mL.
Resulta útil al preparar bibliotecas, reacciones enzimáticas, retrotranscripción u otros ensayos en los que necesitas ajustar una cantidad concreta de ARN. El valor es una estimación basada en absorbancia: no sustituye la evaluación de pureza ni corrige interferencias de contaminantes.
Datos de absorbancia
A
×
Resultado
—
Concentración estimada de ARN
Concentración antes de diluir—
Factor de dilución—
Concentración final—
Concentración de ARN (ng/µL) = A260 × 40 × factor de dilución
El factor 40 corresponde a la aproximación espectrofotométrica habitual para ARN monocatenario. Como 1 µg/mL = 1 ng/µL, el valor numérico se mantiene al expresar el resultado en ng/µL.
Qué significa el resultado
El resultado representa la cantidad estimada de ARN por microlitro de la muestra original, después de corregir la dilución realizada para la lectura.
La absorbancia puede incluir contribuciones de otros compuestos; para trabajos críticos conviene contrastar la concentración con el método y los controles adecuados.
Datos: A260 = 0,25 y factor de dilución = 10.
Cálculo: 0,25 × 40 × 10 = 100 ng/µL.
Resultado: la muestra original contiene aproximadamente 100 ng/µL de ARN.
¿Por qué se usa el valor 40 en el cálculo?
Para ARN monocatenario, una absorbancia A260 de 1 se aproxima habitualmente a 40 µg/mL en condiciones estándar. El resultado puede variar con el instrumento, el blanco y la composición de la muestra.
¿Qué factor de dilución debo introducir?
Usa el factor total aplicado antes de medir. Por ejemplo, mezclar 1 parte de muestra con 9 partes de diluyente corresponde a una dilución 1:10 y, por tanto, a un factor 10.
¿ng/µL y µg/mL son equivalentes numéricamente?
Sí. 1 ng/µL equivale a 1 µg/mL, por lo que la conversión no cambia el valor numérico.
¿La calculadora corrige la pureza del ARN?
No. La concentración se estima a partir de A260 y del factor de dilución; índices como A260/A280 o A260/A230 deben evaluarse por separado.
¿Qué ocurre si la absorbancia está fuera del intervalo lineal del equipo?
La estimación puede perder fiabilidad. Si la lectura es demasiado alta, suele ser preferible diluir la muestra y repetir la medida dentro del intervalo recomendado por el fabricante.