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Calculadora de concentración de ADN por absorbancia

Estima la concentración de ADN a partir de una lectura de absorbancia a 260 nm (A260), el factor de dilución aplicado antes de la lectura y un factor de conversión. Este enfoque se utiliza habitualmente en cuantificación espectrofotométrica, aunque el factor apropiado depende del tipo de ácido nucleico y de las condiciones de medida.

La calculadora deja el factor de conversión como entrada para evitar asumir que todas las muestras de ADN responden igual. Con el valor predeterminado de 50, una A260 de 1,0 corresponde numéricamente a 50 ng/µL para ADN bicatenario bajo la convención habitual. El resultado es una estimación basada en absorbancia y no corrige por contaminantes que también absorban en la región ultravioleta.

Lectura espectrofotométrica

A
×
ng/µL por A260
Resultado
—
concentración estimada de ADN
Concentración en la cubeta—
Corrección por dilución—
A260 introducida—

1. Introduce la A260
Escribe la absorbancia medida a 260 nm después del blanco correspondiente.

2. Indica la dilución
Usa 1× si la muestra se midió sin diluir; si se diluyó, introduce el factor total.

3. Comprueba el factor de conversión
Mantén o cambia el valor según el tipo de ácido nucleico y el método que estés aplicando.

4. Revisa la concentración
El resultado corrige la concentración calculada en la cubeta por el factor de dilución.

5. Evalúa la calidad de la medida
Considera por separado pureza, rango lineal del instrumento y posibles interferencias espectrales.

Concentración = A260 × factor de conversión × factor de dilución

A260 es la absorbancia a 260 nm; el factor de conversión traduce una unidad de absorbancia a concentración; y el factor de dilución corrige cualquier dilución previa.

El factor de conversión no es universal. Debe elegirse de acuerdo con el tipo de muestra y la convención analítica utilizada.

Qué significa el resultado

El resultado es la concentración estimada en la muestra original antes de la dilución usada para la lectura.

La absorbancia puede sobreestimar la concentración si hay compuestos contaminantes que absorben a longitudes de onda próximas.

Datos: A260 = 0,40; factor de dilución = 10×; factor de conversión = 50 ng/µL por unidad A260.

Cálculo: concentración en la cubeta = 0,40 × 50 = 20 ng/µL. Corrección por dilución = 20 × 10 = 200 ng/µL.

Resultado: la concentración estimada de la muestra original es 200 ng/µL.

¿Por qué el factor de conversión es editable?

Porque la relación entre A260 y concentración depende del tipo de ácido nucleico y de la convención utilizada. Un valor único no sirve para todas las muestras.

¿Qué factor de dilución debo usar si no diluí la muestra?

Usa 1×. De ese modo la concentración calculada corresponde directamente a la lectura original.

¿Una A260 alta siempre significa más ADN?

No necesariamente. Otros compuestos pueden contribuir a la absorbancia y algunas lecturas pueden quedar fuera del rango lineal del instrumento.

¿La calculadora evalúa pureza con A260/A280?

No. Solo estima concentración a partir de A260; las razones de pureza requieren lecturas adicionales y una interpretación separada.

¿Puedo usar el resultado para normalizar muestras?

Sí como estimación inicial, siempre que la medición sea adecuada para tu aplicación. Para trabajos sensibles puede ser conveniente confirmar la concentración con un método más específico.